久久精品99国产亚洲-欧美日韩手机在线成人-91老司机精品自在线拍-黄片av毛片免费在线观看

歡迎光臨北京和一生物科技有限公司網(wǎng)站!
誠信促進發(fā)展,實力鑄就品牌
服務熱線:

18813176065

產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁 > 技術(shù)文章 > 細胞凍存和復蘇常見問題!

細胞凍存和復蘇常見問題!

發(fā)布時間: 2023-12-05  點擊次數(shù): 515次

 

 

凍存細胞一般常用胎牛血清(FBS)和二甲基亞砜(DMSO)。血清是維持細胞生存環(huán)境;DMSO是冷凍保護劑,使細胞免受低溫冰晶形成、及滲透壓改變而導致的物理損傷;

細胞培養(yǎng)理論上基本建議的是兩種:70%培養(yǎng)基 + 10%DMSO+ 20%胎牛血清或者10%DMSO+ 90%胎牛血清 。

但經(jīng)過有些實驗室經(jīng)過對比發(fā)現(xiàn):"10%的DMSO,90%的血清"復蘇效果相對比"70%培養(yǎng)基 + 10%DMSO+ 20%血清"好。

 

 

DMSO產(chǎn)品咱就不多說了,什么品牌都有,只要是選擇細胞培養(yǎng)級別的,效果應該差不多。不過我用的是MP Biomedicals二甲基亞砜(DMSO),效果還可以。

對于胎牛血清的選擇就要相對謹慎了,市面上胎牛血清品牌可以說是魚龍混雜,剛看過新聞的客戶就會知道,高仿產(chǎn)品橫行。慎重起見,給大家推薦CellMax品牌胎牛血清,目前有澳洲血清(庫存緊張)和中國血源胎牛血清可供大家試用,購買。

 

 

細胞凍存和復蘇需要注意哪些呢?

 

 

1、細胞本身的狀態(tài)

一般情況下細胞的復蘇還與原代細胞的活性有關,如果要凍存的細胞懸液本身活性不高的話,后面復蘇的存活率也不高。

 

2、凍存細胞數(shù)量要足夠

無論你再怎么小心,細胞在冷凍和復蘇的時候都是最脆弱的,總會死掉一批。所以,一開始就要保證凍存細胞的數(shù)量足夠。

 

3、慢凍快融

一般情況下,細胞凍存時要遵循“慢凍快融"的原則。標準的降溫速度是1-2℃/min ,當溫度到達-25℃,降溫速度可加快至5-10℃/min,到-80℃可直接入液氮。有些實驗室是梯度凍存:4度,-20,-80,液氮,依次凍存。而復蘇速度越快越好。從液氮罐里取出來之后,迅速放在37°C水浴中,盡快融化

 

4、注意安全

細胞凍存和復蘇是細胞培養(yǎng)技術(shù)里面最容易出事的部分。凡是和液氮接觸的操作,注意戴保護眼鏡和手套。注意:復蘇的時候,在水浴中搖搖動的時候會有爆炸的可能性。另外, DMSO是有毒致癌的。接觸的時候務必要帶好手套。

 

5、做好標記

對于凍存細胞,一定要做好標記。如:細胞名稱、代數(shù)和凍存日期。特別是公共實驗室,更要做好標記,避免找不到自己的細胞。

 

6、DMSO是否去除

由于DMSO是一種有毒致癌物質(zhì)。那么,解凍之后,應不應該去除凍存液中的DMSO呢?答案是no。除了極少數(shù)特別注明的對DMSO敏感的細胞外,99%的細胞都不需要去除DMSO。后面細胞培養(yǎng)中頻繁換液會慢慢去除掉DMSO。

 

 

聯(lián)


午夜国产成人福利视频| 超碰在线免费公开中国黄片| 欧美日韩视频中文字幕| 视频在线观看色一区二区| 国产精品美女午夜福利| 粉嫩国产美女国产av| 人妻一区二区三区多毛女| 日本福利写真在线观看| 国产无摭挡又爽又色又刺激| 老司机精品视频在线免费| 老司机精品线观看86| 殴美女美女大码性淫生活在线播放| 美日韩一区二区精品系列| 丝袜破了有美女肉体免费观看| 午夜色午夜视频之日本| 欧美一区二区三区喷汁尤物 | 久久精品蜜桃一区二区av| 欧美亚洲美女资源国产| 亚洲成人免费天堂诱惑| 亚洲一区二区精品福利| 视频一区日韩经典中文字幕| 日本午夜免费啪视频在线| 黄男女激情一区二区三区| 日韩毛片视频免费观看| 午夜日韩在线观看视频| 激情爱爱一区二区三区| 99在线视频精品免费播放| 亚洲成人免费天堂诱惑| 一区二区三区免费公开| 日韩色婷婷综合在线观看| 欧美人禽色视频免费看| 在线观看视频日韩精品| 激情内射日本一区二区三区| 丰满人妻一二三区av| 欧美美女视频在线免费看| 色婷婷激情五月天丁香| 性欧美唯美尤物另类视频 | 2019年国产最新视频| 欧美日韩黑人免费观看| 五月天丁香婷婷一区二区| 欧美日韩国产免费看黄片|